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利用液氮罐低溫保存人體結膜上皮細胞的案例
目的:探索人眼結膜上皮細胞體外培養(yǎng)和細胞保存的**方法,建立人結膜上皮細胞系,進一步研究人結膜的病理、生理特點及為毒理試驗提供可靠的細胞模型。查特杜瓦瓶
方法:分別用組織塊培養(yǎng)法、機械分離法及混合消化液培養(yǎng)法體外培養(yǎng)正常成年人結膜上皮細胞,通過觀察細胞形態(tài)、生長特性并用原位免疫組化方法鑒定培養(yǎng)細胞;收集第3代和第4代融合的細胞液氮罐凍存,保存30天后復蘇,觀察復蘇成功率。
結果:3種取材方法中,混合消化液培養(yǎng)法細胞生長繁殖較快,培養(yǎng)細胞形態(tài)多樣,貼壁生長。免疫組化Keratin染色陽性,細胞凍存復蘇的成功率均達到90%。組織塊培養(yǎng)法細胞生長比較緩慢,而機械分離法細胞未見貼壁生長。
結論:混合消化液培養(yǎng)法是人結膜上皮細胞培養(yǎng)的**方法,通過液氮罐凍存可保存培養(yǎng)的人結膜上皮細胞。查特杜瓦瓶